Identificação molecular das espécies de leishmânia em lesões cutâneas de pacientes atendidos no... por Hélio Arthur Bacha - Versão HTML

ATENÇÃO: Esta é apenas uma visualização em HTML e alguns elementos como links e números de página podem estar incorretos.
Faça o download do livro em PDF, ePub, Kindle para obter uma versão completa.

AGRADECIMENTOS

Pessoas que foram essenciais para o desenvolvimento, achados e correções deste trabalho. Os erros são de responsabilidade unicamente minha.

Professor Dr. Valdir Sabbaga Amato

Professora Dra. Maria Irma Seixas Duarte

Professor Dr. Vicente Amato Neto

Professora Dra. Lucile Maria Floeter-Winter

Professor Dr. Heitor Franco de Andrade Junior

Professor Dr. Aluisio Augusto Cotrim Segurado

Professor Dr. Marcos Boulos

Professor Dr. Moisés Goldbaum

Professor Dr. Jeffrey Jon Shaw

Professora Dra. Vera Lúcia Fonseca de Camargo-Neves

Dr. Felipe Francisco Tuon

Biólogo Ricardo Andrade Zampieri

Estatística Paula Strassmann

Dra. Melissa Mascheretti

Bibliotecária Marinalva de Souza Aragão

Yvonne Lilian Eisenberg Sarue

Normalização adotada

Esta tese está de acordo com as seguintes normas, em vigor no momento desta publicação:

Referências: adaptado de International Committee of Medical Journals Editors (Vancouver)

Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina, Serviço de Biblioteca e Documentação. Guia de apresentação de dissertações, teses e monografias.

Elaborado por Anneliese Carneiro da Cunha, Maria Julia de A. I. Freddi, Maria F. Crestana, Marinalva de Souza Aragão, Suely Campos Cardoso, Valeria Vilhena. 2ª ed. São Paulo: Serviço de Biblioteca e

Documentação;2005.

Abreviatura dos títulos dos periódicos de acordo com List of Journals Indexed in Index Medicus.

SUMÁRIO

1 INTRODUÇÃO ............................................................................................. 1

1.1 Objetivos ................................................................................................... 5

2 REVISÃO DA LITERATURA ........................................................................ 6

2.1 Leishmaniose – apresentações clínicas ................................................. 10

2.2 Lesões cutâneas – evolução e formas clínicas ....................................... 11

2.3 Leishmaniose Tegumentar Americana e AIDS ....................................... 14

3 LTA – Espécies .......................................................................................... 17

3.1 Leishmania (Leishmania) amazonensis .................................................. 18

3.2 Leishmania (Viannia) naiffi ...................................................................... 18

3.3 Leishmania (Viannia) lainsoni ................................................................. 21

3.4 Leishmania (Viannia) shawi .................................................................... 25

3.5 Leishmania (Viannia) lindenbergi ............................................................ 26

3.6 Leishmania (Viannia) guyanensis ........................................................... 27

3.7 Leishmania (Viannia) braziliensis ............................................................ 28

3.8 Diagnóstico ............................................................................................. 29

3.9 Amplificação genômica ........................................................................... 30

3.10 Técnica de sequenciamento por PCR de SSU – rDNA ........................ 31

3.11 Técnica de PCR (G6PD) ....................................................................... 32

3.12 Preceitos legais e éticos ....................................................................... 33

4 MATERIAIS E MÉTODOS ......................................................................... 34

4.1 Área de estudo ........................................................................................ 35

4.2 Consentimento pós-informado ................................................................ 35

4.3 Critérios de inclusão ............................................................................... 36

4.4 Critérios de exclusão .............................................................................. 36

4.5 Avaliação diagnóstica em todos os pacientes inclusos ........................... 37

4.6 As amostras ............................................................................................ 38

4.7 Extração de DNA do material de biópsia ................................................ 38

5 REAÇÕES EM CADEIA DA POLIMERASE (PCRs) .................................. 39

5.1 PCR com oligonucleotídeos baseada na sequência do gene G6PD ...... 39

5.2 PCR com oligonucleotídeos – sequência do gene SSU rDNA ............... 40

6 RESULTADOS ........................................................................................... 41

6.1 Análise estatística ................................................................................... 46

6.1.1 Metodologia ......................................................................................... 46

6.2 Distribuição dos casos por municípios .................................................... 48

6.3 Espécies por municípios ......................................................................... 51

6.3.1 Metodologia ......................................................................................... 51

6.3.2 Resultados ........................................................................................... 51

6.4 Localização das lesões por espécie ....................................................... 62

6.4.1 Metodologia ......................................................................................... 62

6.4.2 Resultados ........................................................................................... 63

7 DISCUSSÃO .............................................................................................. 65

7.1 Espécies ................................................................................................. 67

7.2 Distribuição dos casos por gênero .......................................................... 71

7.3 Idade ....................................................................................................... 73

7.4 Município de contaminação .................................................................... 74

7.5 Tempo de evolução por espécie ............................................................. 75

7.6 Número de lesões por espécie ............................................................... 76

7.7 Local de lesão ......................................................................................... 78

7.8 Observação final ..................................................................................... 80

8 CONCLUSÕES .......................................................................................... 82

9 REFERÊNCIAS ......................................................................................... 84

10 ANEXO .................................................................................................. 103